Oqsil uchun Ksantoproteinovaya reaktsiya: belgilari va formula tenglama

maqsadida oqsil uchun ksantoproteinovaya reaktsiyasini ishlatiladigan ko'plab oziq-ovqat sifat tarkibini tashkil etish. aralashmada muattar aminokislotalar borligi ijobiy sinov namunasi rangi o'zgaradi.

protein nima

Bu, shuningdek, tirik tana uchun qurilish materiali hisoblanadi, bir oqsili, deb ataladi. Oqsillar soch, teri va ligamentlerinin bo'lishi, turli organlar yaralangan va o'lik to'qima tuzilmalarni qayta tiklash, mushak hajmini saqlab. ular ishtirokidagi ko'plab gormonlar va immun tizimi hujayralari normal ishlashiga tomonidan boshqariladi, qizil qon tanachalariga ishlab chiqaradi.

Bu 6 ~ 10 ³ dalton ko'ra ommaviy katta bo'lgan bir polipeptid bo'lgan murakkab molekulalar bo'lgan. birlashganda, peptid rishtalari bir qator amino kislotalar qolgan burdalarni shakllantirish oqsil strukturasi.

oqsillarning tuzilishi

past molekulyar og'irligi peptid bilan solishtirganda bu moddalarning o'ziga xos xususiyati, ular, bir, uch o'lchamli fazoviy tuzilishini ishlab jalb o'zgaruvchan darajalilardan ta'sir qo'llab-quvvatladi, deb. Oqsillar to'rt-tuzilishga ega. ularning har biri uchun o'z xususiyatlariga ega.

oqsil uchun ksantoproteinovaya reaktsiyasini tan amino kislotalar sekans olingan molekulalar boshlang'ich tashkiloti asosida, tuzilishi, deb. Bu tuzilishi bir vaqti-vaqti bilan takrorlab peptid aloqa -HN-CH-Co, qay bir qismi radikallar aminokislotalar yon zanjirlar bo'ladi. Ular bir butun sifatida moddaning yanada xususiyatlarini belgilaydi.

asosiy protein tuzilishi etarlicha kuchli hisoblanadi, bu peptid obligatsiyalar kuchli kovalent bog o'zaro ta'sirlarning borligi bilan bog'liq. keyingi darajadagi shakllantirish dastlabki bosqichida belgilangan sifatlari qarab sodir bo'ladi.

o'rta tuzilmasini shakllantirish tufayli vodorod bog'lari burilishlar o'rtasida tashkil bo'lgan bir spiral amino kislotalar ketma bżkżm mumkin.

molekulalar oliy darajasida tashkil etish vodorod, disülfid, değerdeş yoki ion aralashma bilan, ular orasidagi barcha mumkin bo'lgan ulanishlar yuzaga bilan boshqa bo'laklaridan bir spiral biri qo'llash orqali hosil. Natijada kürecikler shaklida birlashmasidir.

ular orasidagi kimyoviy obligatsiyalar shakllantirish bilan uchlamchi tuzilmalari fazoviy joylashtirish molekulasi yoki to'rtlik darajadagi yakuniy shakli shakllanishiga olib keladi.

aminokislotalar

Ular oqsillar kimyoviy xususiyatlarini sabab. bir xil ketma-ketlikda polipeptid tashkil qilish haqida 20 yirik aminokislotalar bor. shakl hydroxyproline va hidroksilizin bu ham ataladi nodir aminokarboksilik kislota asosiy peptidin olingan.

tan ksantoproteinovaya protein reaktsiya belgisi sifatida, ayrim aminokislotalar mavjudligi, ularning tarkibi muayyan tuzilmalar mavjud chorlaydigan, reagentlar rangi o'zgarishi beradi.

U qaytib, ular amino guruh vodorod atomining o'rnini bosish yuz bergan karboksilik kislotalar mavjud.

molekulada misol tuzilishi xizmat qilishi mumkin bo'lgan tarkibiy formula oddiy amino kislotasi kabi glisini (HNH- HCH- COOH).

Bu holda vodorod CH ₂ biri - bir benzol halqa, amino, sülfo, karboksi tashkil topgan uzoq radikal bir uglerod bilan almashtirilishi mumkin.

Nima ksantoproteinovaya reaksiya qiladi

turli metodlarni foydalanib oqsillarning sifatli tahlil qilish uchun. Bu reaktsiyalar o'z ichiga oladi:

• binafsha rang paydo bilan biüre;
• DFO bir ko'k-binafsha eritmasi hosil qilish;
• qizil rang tashkil bilan formaldegid;
• Nogier kulrang-qora rangini cho'ktirish uchun.

amalga oshirishda har bir usul oqsillarni borligini va ularning molekulasi muayyan funktsional guruhlar mavjudligini isbotladi.

oqsil uchun reaktsiya bor ksantoproteinovaya. Bu, shuningdek, borini Mulder deyiladi. Bu aromatik va Heterosiklik aminokislotalar bor bo'lgan oqsillar uchun rang reaktsiyalar, degan ma'noni anglatadi.

Bunday namuna jarayonining bir xususiyati nitrolama bo'lgan kislota, nitrat benzol halqasida uchun nitroguruhini o'tish xususan tsiklik amino kislotalar quyqa.

Bu jarayonning natijasi Ezilgan nitro birikmalar, shakllantirish hisoblanadi. Bu asosiy xususiyati ksantoproteinovaya reaktsiya hisoblanadi.

Nima amino kislotalar aniqlanadi

Barcha aminokarboksilik kislota kabi bir misol yordamida aniqlash mumkin emas. ksantoproteinovaya oqsil ochish reaktsiya asosiy xususiyati - molekulasi aminokislotalar bilan benzol halqasida yoki heterosiklik xalqqa mavjudligi.

protein (fenilalanin uchun), bir Fanil guruhi, va (tirozin yilda) tubdan bir hidroksifenil bor bo'lgan ikki muattar aminokarboksilik kislotalar, izolyatsiya qilingan, chunki.

ksantoproteinovaya reaktsiya bir aromatik yadro ega heterosilik amino kislotalar, triptofan, indol belgilanadi bilan. oqsil yuqorida birikmalar mavjudligi sinov muhitida xos rang o'zgarishini beradi.

Nima foydalanish uchun reagentlar

reaktsiyasini amalga oshirish uchun tuxum oqsili, yoki o'simlik kelib chiqishi bir 1% eritma tayyorlash uchun kerak ksantoproteinovaya.

Odatda sarig'i dan oqsil yanada ajratish uchun bo'lingan tuxum, ishlatiladigan. oqsil 1% eritmasi uchun tozalangan suv o'n baravar miqdorda suyultiriladi edi. natijada oqsil suyuqlik parchalanganidan keyin tülbent bir necha qatlamlari orqali filtrlanadi lozim. Bu yechim, salqin joyda saqlanishi kerak.

Bu o'simlik oqsili bilan reaktsiyasini amalga oshirish mumkin. eritma tayyorlash uchun 0,04 kg bo'lgan miqdorda bug'doy un ishlatiladi. tozalangan suv 0,16 l. moddalar haqida + 1 ° C haroratda bir salqin joyda 24 soat davomida bog'lab bir shisha idishga aralash edi Qog'oz buklangan filtr - kunning oxirida hal keyin paxta va uning birinchi filtrlash ortidan, kanştınldı. natijada suyuq bir salqin joyda saqlanadi edi. Bu yechim albumin fraksiyasining asosan mavjud.

Asosiy reaktiv ishlatiladi nitrat kislota joyga jamlanganda sifatida reaktsiya ksantoproteinovaya amalga oshirish uchun. Bundan tashqari reagentlar 10% natriy gidroksid yoki ammiak, jelatin eritmasi va unconcentrated fenol bir yechim hisoblanadi.

metodologiyasi

toza kolba ichida 2 ml, bir miqdor 1% oqsil eritmasi -th tuxum, un amalga oshiriladi. flokülasyon to'xtadi bu uchun nitrat kislota 9 tomchi qo'shiladi. Yakuniy aralash asta-sekin yo'qoladi va uning rang hal kirib ketadi sariq çökelti, natijada eshitildi.

suyuq devor bo'ylab quvur ichida soviganda qariyb 9 tomchi qo'shiladi natriy gidroksid, jarayon uchun ortiqcha hisoblanadi jamlangan. reaktsiya o'rta ishqoriy bo'ladi. Tarkib Probirkaga apelsin rang bo'ladi.

xususiyatlari

ksantoproteinovaya oqsillarning harakatlar tomonidan nitrat kislota sifatli reaktsiyasini chaqirdi beri, namuna kiritilgan ostida amalga oshiriladi davlumbaz. joyga jamlanganda, kaustik moddalar bilan ishlashda barcha xavfsizlik choralarni ergashing.

kolba mazmunan ozod egasidan uni ekranga va Nishab tanlashda hisobga olinishi lozim isitish jarayonida paydo bo'lishi mumkin.

nitrat kislota va kaustik soda terish faqat og'iz orqali, bir shisha pipet va nok, rezina man pipetka yordamida lozim.

fenol bilan nisbiy reaktsiya

aniqlik, jarayoni va Fanil guruhlari borligi tasdiqlash uchun shunga o'xshash namuna hydroxybenzene bilan amalga oshiriladi.

suyultiriladi fenol 2 ml qilish tube, keyin asta-sekin devor bo'ylab, nitrat kislota 2 ml qo'shiladi. Bu sariq bo'lib qaerga yechim, isitish duchor etildi. Bu reaksiya benzol halqasida borligi sifatli.

Process hydroxybenzene 35 15 bir ulushi P-nitrofenol va o-nitrofenol aralashmasidan shakllantirish ortidan nitrat kislota bilan nitrolanmış.

jelatin bilan solishtirish test

oqsil, deb ksantoproteinovaya reaktsiya muattar tuzilishi bilan bir amino kislotalar ochib isbotlash uchun, bir fenolik guruh yo'q oqsillarni foydalaning.

toza kolba ichida 2 ml, bir miqdor 1% jelatin eritmasi amalga oshiriladi. Bu uchun nitrat kislota 9 tomchi qo'shiladi. Yakuniy aralash isitiladi. yechim, bir aromatik tuzilishi bilan aminokislotalar yo'qligini isbot qilmaydi, sariq rangli emas edi. Ba'zan tufayli oqsil aralashmalarning mavjudligi uchun atrof-muhit engil sarg'ayishdan bor.

kimyoviy tenglamalar

Ikki qadam reaksiyaga ksantoproteinovaya oqsillarni ishlaydi. Formula birinchi bosqichi nitrolama jarayoni nitrat kislota yordamida amino kislotalar, molekulalarni ta'riflaydi.

Bir misol, nitrotyrosine va dinitrotirozina shakllantirish tirozin uchun nitroguruhini ilova hisoblanadi. benzol halqasida birinchi holda bir NO ₂ -radical biriktirilgan va ikkinchi aralashma ikki vodorod atomining No ₂ bilan o'zgartiriladi ega _bo'ladi. nitrotyrosine molekulasi hosil qilish nitrat kislota bilan reaksiyaga vakili Kimyoviy formula ksantoproteinovaya tirozin reaktsiya.

Nitration jarayoni sariq ohangda o'tish rangsiz rang bilan birga bo'ladi. oqsillar amino kislotalar o'z ichiga olgan, bu reaksiya amalga oshirishda hal o'zgarishlar fenilalanin va triptofan va rangini qolgan burdalarni terib.

Ikkinchi qadam ammoniy yoki natriy gidroksid bilan, ayniqsa nitrotyrosine tirozin molekulalar, nitrallash reaktsiya mahsuloti hisoblanadi. Natijada bir natriy yoki ammoniy tuzi sariq-sariq, to'q rang hisoblanadi. Bunday reaksiya nitrotyrosine molekulalar imkoniyati bilan bog'liq quinoid shaklida harakat. Keyinchalik birlashtirilib ikki tomonlama aloqalarni bir Kino tizimiga ega nitron kislotasi, undan hosil tuz.

Shunday qilib oqsillarni ksantoproteinovaya reaktsiyasini tugaydi. tenglama ikkinchi bosqich yuqorida taqdim etdi.

natijalar

uch quvurlar mavjud suyuqliklar tahlil davomida, mos yozuvlar eritmasi fenol bilan suyultiriladi. bir benzol rishtasi bilan moddalar nitrat kislota bilan sifatli reaktsiyasini berishga. Natijada, u hal rangini o'zgartiradi.

Ma'lumki, jelatin kollagen bir gidrolizlanadi formasini o'z ichiga olgan. oqsil aminokislotalar aromatik tuzilishga ega emas. kislota bilan reaksiyaga o'rta rangli o'zgarish yo'q.

Uchinchi Probirkaga oqsillar ksantoproteinovaya ijobiy reaktsiya bor. muattar tuzilishi bilan barcha oqsillar, u eritma rangi o'zgarishi berilgan bir Fanil guruhi yoki indol ring, bo'lsin: quyidagicha xulosa qilish mumkin. Bu sariq rang bilan, nitro birikmalar shakllantirish bilan bog'liq.

bir rangli reaksiya olib borish aminokislotalar va oqsillar turli kimyoviy tuzilmalar borligini isbotlaydi. O'RNAK jelatin uning tarkibi, bir Fanil guruhi yoki uslub infratuzilmani ega emas aminokarboksilik kislota o'z ichiga oladi, deb ko'rsatadi.

unga kuchli nitrat kislota qo'llaniladigan ksantoproteinovaya reaktsiya bilan teri sararması bilan izohlash mumkin. Shu rang uning o'xshash tahlil davomida ko'pikli sut bo'ladi.

Klinik laboratoriya Amalda bu rang namunasi siydikda oqsil aniqlash uchun foydalanilmaydi. Bu siydik o'zi sariq rangi tufayli.

Ksantoproteinovaya reaktsiya borgan sari turli oqsillar bir qismi sifatida, masalan, triptofan va tirozin kabi aminokislotalar miqdori o'lchanishi uchun ishlatiladigan bo'ldi.